在水產(chǎn)養殖過(guò)程中，因藥物使用、疾病因素、溶氧、pH值、氨、亞硝酸鹽、硫化氫等水質(zhì)因子以及養殖密度（如高密度稱(chēng)為擁擠脅迫）、飼料的選擇與投喂、運輸暴露等都會(huì )對水產(chǎn)養殖動(dòng)物造成應激反應。
應激發(fā)生后，輕則導致魚(yú)厭食或餌料系數偏高，高則導致魚(yú)發(fā)病死亡，因而控制或減少魚(yú)類(lèi)應激，對于獲得高產(chǎn)、穩產(chǎn)至關(guān)重要。

本試驗旨在驗證愛(ài)綠寧（水產(chǎn)動(dòng)物專(zhuān)用型）對鳊魚(yú)生長(cháng)與抗應激能力的影響。

1  材料與方法

1.1  試驗魚(yú)及試驗設計

試驗用鳊魚(yú)（Megalobrama amblycephala）為當年人工繁殖的同一批苗種，購自重慶市榮昌縣梅石壩漁場(chǎng)，試驗在西南大學(xué)水產(chǎn)系室內循環(huán)養殖系統中進(jìn)行。試驗前暫養一周，每天早、中、晚飼喂對照
組飼料3次至飽食。試驗采用的養殖設施為長(cháng)方形玻璃缸(總體積0.4m3、水體體積0.2 m3)。養殖試驗期間均連續充氧（除投餌期間外）。

試驗開(kāi)始前停飼 24 h。選擇體重相近(5.2±0.4)g、體格健壯的幼魚(yú)1200尾，隨機分成4組，每組三個(gè)缸、每缸100尾，具體分組見(jiàn)表1。每天早、中、晚投喂3次，至飽食，投喂結束后 30 min，吸出池內殘
餌及糞便。養殖試驗共進(jìn)行42d，試驗期間水溫25.0±1.0℃，pH7.5±0.5，溶氧≥5mg/L，氨氮<0.2mg/L，余氯<0.1mg/L。

1.2  試驗飼料

飼料由西南大學(xué)水產(chǎn)系水產(chǎn)動(dòng)物繁育和健康養殖研究中心制作。配制飼料前，飼料原料均經(jīng)粉碎機粉碎并全部過(guò)60目篩，按配方要求均勻混合成粉料，在30℃鼓風(fēng)干燥箱內干燥24 h，置冰箱0℃保存。愛(ài)綠
寧（水產(chǎn)專(zhuān)用型）產(chǎn)品由北京愛(ài)綠生物科技有限公司提供。具體配方組成和營(yíng)養成分分析見(jiàn)表2。

1.3  生長(cháng)性能相關(guān)指標

1.3.1 生長(cháng)速度

以魚(yú)質(zhì)量的鮮重變化、增重率和特定生長(cháng)率等表示生長(cháng)速度。增重率( ％ ) ＝ [( Wt-W0) ／W0]×100％；特定生長(cháng)率( ％/d )＝[(LnW t-LnWo) /d]×100%，W0和Wt分別表示養殖開(kāi)始和結束時(shí)的魚(yú)體質(zhì)量
（g）。

1.3.2  飼料利用效率

以飼料系數和蛋白效率表示，飼料系數=飼料投喂量 / 魚(yú)體增重量；蛋白效率=( Wt-W0) ／F×P％，F指飼料消耗量，P%指飼料蛋白質(zhì)含量。

1.4  抗應激機能測定

1.4.1 運輸應激

試驗設計  鳊魚(yú)養殖試驗結束后停止喂食24 h。AL1、AL2和AL3組的各重復缸中分別取出5尾魚(yú)放入魚(yú)苗運輸袋中充入純氧并打包；對照組則各重復缸中分別取出10尾，每個(gè)運輸袋中放入5尾鳊魚(yú)充入純氧
并打包（具體見(jiàn)表3），用皮卡車(chē)運輸2 h。運輸后立即將魚(yú)快速深度麻醉后采集血樣。運輸過(guò)程中皮卡車(chē)平均速度為50～60 km／h。

1.4.2 暴露應激

魚(yú)的取樣方法與運輸應激相同，取樣后置于空氣中同等養殖溫度下暴露3min。

取血、樣品處理及測定與運輸應激相同。

1.4.3  嗜水氣單胞菌攻毒試驗

嗜水氣單胞菌（BYK-038）毒株來(lái)源于上海海洋大學(xué)農業(yè)部漁業(yè)動(dòng)植物病原庫，病原菌按病原庫推薦培養方法在28°C條件下培養24h后，無(wú)菌生理鹽水洗滌后，置離心機中1000 g條件下離心10min。去
上清液，用無(wú)菌生理鹽水調整細菌濃度至5×107 cfu。按0.10mL/尾的劑量注射到鳊魚(yú)腹腔，每個(gè)試驗組30尾魚(yú)，10尾/重復，其后連續7天記錄其死亡率。

1.5 試驗數據的統計分析

采用SPSS17.0 統計軟件對數據進(jìn)行統計學(xué)分析，先對數據作單因素方差分析(ANOVA)，處理間若有顯著(zhù)差異，再作Duncan's多重比較，P<0.05表示差異顯著(zhù)。

2  試驗結果

2.1 對生產(chǎn)性能的影響

愛(ài)綠寧以100～200g/t劑量添加后，鳊魚(yú)的生長(cháng)性能指標如表4所示。從表中可以看出：1）愛(ài)綠寧顯著(zhù)提高了鳊魚(yú)的增重率和特定生長(cháng)率（P<0.05），提高幅度分別為21.8%～30.9%、11.7%～15.9%，
但各AL組之間無(wú)顯著(zhù)差異（P>0.05）；2）蛋白效率也因愛(ài)綠寧的補充而顯著(zhù)提高了25.8%～34.0%，并隨著(zhù)愛(ài)綠寧補充量的增加而呈現逐漸提高的趨勢，AL3組較對照組和AL1組均有顯著(zhù)提高（P<0.05）；
3）而飼料系數則與蛋白效率呈現出完全相反的變化規律，有效降低20.6%～25.3%；4）愛(ài)綠寧的補充對鳊魚(yú)成活率較對照組均有顯著(zhù)提高（P<0.05）。

2.2 運輸應激對鳊魚(yú)的影響

2.2.1 鳊魚(yú)運輸后血清皮質(zhì)醇激素含量的變化

第21d：經(jīng)過(guò)2h的運輸后，除陽(yáng)性對照組有1尾死亡外，陰性對照、AL1、AL2和AL3組均未出現死亡。在運輸的過(guò)程中，陽(yáng)性對照組魚(yú)在氧氣袋中，水波的動(dòng)蕩下表現出煩躁不安，激烈游動(dòng)，用頭不斷沖撞
袋壁，試圖逃離這種環(huán)境。而AL1、AL2和AL3組鳊魚(yú)在運輸初期也表現出竄出水面等較激烈反應，持續約15~20min即恢復平靜，靜臥袋底或輕輕游動(dòng)。運輸結束后，皮質(zhì)醇激素含量檢測結果表明，陽(yáng)性對照組、
AL1、AL2和AL3組的魚(yú)血清皮質(zhì)醇激素含量較陰性對照組均顯著(zhù)提高（P<0.05），但AL1、AL2和AL3組的血清皮質(zhì)醇激素含量比陽(yáng)性對照組顯著(zhù)降低（P<0.05）（見(jiàn)表5）。

第42d：其趨勢與第21d相同。

2.2.2 鳊魚(yú)運輸后血清蛋白和酶活性的變化

第21d：對2h運輸應激后鳊魚(yú)血清總蛋白（TP）和白蛋白（AP）測定表明，AL1、AL2、AL3和陽(yáng)性對照組魚(yú)血清TP和AP均較陰性對照組顯著(zhù)提高（P<0.05），但AL1、AL2和AL3的TP和AP較陽(yáng)性對照組顯
著(zhù)降低（P<0.05）。

陽(yáng)性對照組的鳊魚(yú)血清谷丙轉氨酶（GPT）和堿性磷酸酶（ALT)較陰性對照組顯著(zhù)提高（P<0.05），但AL2和AL3的血清GPT和ALT與陰性對照組相比無(wú)顯著(zhù)差異（P>0.05）。

第42d：各組間TP、AP、GPT和ALT變化趨勢與第21d基本一致。

2.2.3 鳊魚(yú)運輸后血清中其它幾種物質(zhì)含量的比較

第21d：從表5中可以看出，除AL3外，運輸組的魚(yú)血糖（GLU）與陰性對照相比有顯著(zhù)增加（P<0.05），但均顯著(zhù)低于陽(yáng)性對照組（P<0.05）。

陽(yáng)性對照組的血清甘油三酯（TG）和血清總膽固醇（TC）較陰性對照組顯著(zhù)提高（P<0.05），愛(ài)綠寧補充組的血清TG和TC則與陰性對照組無(wú)顯著(zhù)差異（P>0.05）。

第42d：GLU在各組間的變化趨勢與第21d同；愛(ài)綠寧補充組的血清TG和TC與陰性對照組無(wú)顯著(zhù)差異（P>0.05）。

2.3  鳊魚(yú)暴露后血清中其它幾種物質(zhì)含量的比較

第42d：從表6中可以看出，鳊魚(yú)暴露應激血清學(xué)變化呈現出與運輸應激幾乎一致的變化規律，表明飼料中添加愛(ài)綠寧對鳊魚(yú)具有很好的抗暴露應激作用。 

2.4  細菌攻毒后成活率

    未經(jīng)嗜水氣單胞菌攻毒的陰性對照組在觀(guān)察的7天內未出現死亡。其余各組從第2d開(kāi)始出現死亡，除陽(yáng)性對照和AL2組外，各組至第5d后停止死亡。AL1、AL2和AL3組的鳊魚(yú)成活率分別為73%，66%和70%，
均顯著(zhù)高于陽(yáng)性對照組鳊魚(yú)成活率（50%）。

3  小結

3.1  愛(ài)綠寧對鳊魚(yú)生產(chǎn)性能的影響

愛(ài)綠寧的補充顯著(zhù)提高了鳊魚(yú)的增重率和特定生長(cháng)率，但100、150和200g/t的補充量之間沒(méi)有顯著(zhù)差異；愛(ài)綠寧的補充能顯著(zhù)提高鳊魚(yú)對飼料蛋白的利用效率，且隨補充量的增加而提高，飼料系數則與蛋
白效率相反，呈逐步降低趨勢；愛(ài)綠寧補充組的鳊魚(yú)成活率較對照組顯著(zhù)提高。

3.2  愛(ài)綠寧對鳊魚(yú)運輸應激的緩解作用

3周和6周養殖后均進(jìn)行了運輸應激，陽(yáng)性對照組的鳊魚(yú)血清皮質(zhì)醇、白蛋白、血清總蛋白和血糖含量等指標均顯著(zhù)高于陰性對照組，各愛(ài)綠寧添加組的鳊魚(yú)血清相應指標也基本均顯著(zhù)高于陰性對照組，但
與較陽(yáng)性對照組比較則顯著(zhù)降低。陽(yáng)性對照組的鳊魚(yú)經(jīng)過(guò)運輸應激后，多項生化指標如谷丙轉氨酶、堿性磷酸酶、甘油三酯和膽固醇等均呈較大幅度上升，而愛(ài)綠寧補充組則上升幅度減小，甚至與陰性對照組
無(wú)顯著(zhù)差異。表明飼料中補充愛(ài)綠寧后，在運輸應激中具有很好的抗應激效果。

3.3  愛(ài)綠寧對鳊魚(yú)暴露應激的緩解作用

3周和6周養殖試驗之后的3min暴露應激發(fā)現，愛(ài)綠寧補充組的鳊魚(yú)血清皮質(zhì)醇激素、白蛋白、血清總蛋白和血糖含量等指標比陰性對照組均顯著(zhù)提高，但較陽(yáng)性對照組有顯著(zhù)降低（P<0.05）。陽(yáng)性對照
組的鳊魚(yú)經(jīng)過(guò)暴露應激后，多項生化指標如谷丙轉氨酶、堿性磷酸酶、甘油三酯和膽固醇等均呈較大幅度上升，而愛(ài)綠寧補充組則上升幅度減小，甚至與陰性對照組無(wú)顯著(zhù)差異。表明補充愛(ài)綠寧對抗暴露應激
效果良好。

3.4  愛(ài)綠寧對鳊魚(yú)抗病能力的影響

經(jīng)嗜水氣單胞菌攻毒后，各組鳊魚(yú)均出現了死亡，成活率較陰性對照組均顯著(zhù)降低。但與此同時(shí)，愛(ài)綠寧補充組的鳊魚(yú)攻毒后成活率相比陽(yáng)性對照組顯著(zhù)提高，表明愛(ài)綠寧能顯著(zhù)提高鳊魚(yú)的抗病能力。

（西南大學(xué)水產(chǎn)動(dòng)物繁育和健康養殖研究中心 唐冬梅 黃玉萍 鄭宗林）